تراریزش ژن گزارشگر gus به پنبه و مطالعه وراثت و بیان آن در نسل دوم پنبه تراریخته

نویسندگان

چکیده

تولید گیاهچه تراریخته پنبه (Gossypium hirsutum L.) با واسطه اگروباکتریوم سویه LBA4404 و پلاسمید pBI121 حاوی ژن گزارشگر gus و ژن نشانگر انتخابی nptII به ترتیب با پیشبرهای CaMV35S و NOS بررسی شد. پنبه‏هایی که بوسیله ژن gus تراریخته شده بودند و بیان ژن مذکور در بافت‏های مختلف (الیاف و دانه گرده) به اثبات رسیده بود از نظر وراثت ژن مذکور در نسل دوم (T1) با استفاده از روش‏های محیط کشت انتخاب، PCR و رنگ‏آمیزی GUS مورد بررسی قرار گرفتند. نمونه های بذری لاین های تراریخته (T1) به همراه بذر های غیر تراریخته به عنوان شاهد، استفاده شدند. آزمون‏‌‌‌ مجذور کای نشان داد که تفرق ژن gus در لاین‏های A3، A4 و A7 در نسل دوم (T1) با نسبت مندلی 3:1 مطابقت دارد. به منظور بررسی حضور ژن nptII در نسل دوم (T1) تکثیر PCR انجام شد که حضور ژن در تمامی لاین‏های تراریخته (+gus) مورد بررسی به استثنای یک لاین مورد تایید قرار گرفت. نتایج حاصله حاکی از پایداری ژن در نسل دوم پنبه تراریخته بود.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Transformation of Cotton Using a gus Gene and Study of its Inheritance and Expression in Second Generation (T1) of Transgenic Cotton

نویسندگان [English]

  • M. TOHIDFAR
  • L. RAMEZANPOUR
  • R. GOLABCHIAN
چکیده [English]

Production of transgenic cotton (Gossypium hirsutum L.) was studied utilizing Agrobacterium-mediated strain LBA4404 and pBI121 plasmid. This plasmid contains gus as a reporter gene driven by the CaMV35S promoter and nptII gene driven by NOS as selection marker. In this study, the inheritance of gus gene was evaluated using selective media, PCR and GUS staining in the second genertaion (T1) of transgenic cotton obtained from those plants in which the expression of gus gene was confirmed in different tissues (pollen and fiber). Seed samples from transgenic lines (T0) along with non transgenic control seeds were employed. The ?2 test indicated that the inheritance of gus gene in A3, A4 and A7 lines follows Mendilian ratio for single gene segregation (3:1). PCR amplification was carried out to test the presence of nptII gene in the second generation. The results revealed the presence of nptII gene in all the GUS positive transgenic plants except in one. The results confirmed the stability of gus gene in the second generation.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Agrobacterium
  • Cotton
  • enginereeing
  • Genetic
  • Gus gene
  • Inheritance
  • Transformation

فایل ها

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار