Document Type : Research Paper
Authors
1 Department of Agronomy and Plant Breeding, Shahid Chamran University of Ahvaz, Iran
2 Department of Soil Science, Shahid Chamran University of Ahvaz, Iran
Abstract
Keywords
مقدمه
تنش خشکی و شوری، از مهم ترین تنشهای غیر زیستی محدود کننده تولید محصولات زراعی عمده جهان یعنی گندم و برنج هستند. این تنش ها، پایداری عملکرد گیاهان زراعی را به شدت تحت تأثیر قرار می دهند. در بین گیاهان زراعی، گندم یکی از مهم‌ترین محصولات غذایی است که تجارت جهانی آن، بیش از سایر محصولات کشاورزی است و حدود ٧٠ درصد از اراضی زیر کشت آن، در مناطق خشک و نیمه خشک قرار گرفته است (Yan & Shi, 2013). شیوه‌های زراعی تا حد زیادی باعث افزایش ذخیره سازی و حفظ رطوبت در یک سیستم کشت می‌شوند. این شیوه‌ها می‌توانند رشد و عملکرد محصول که در ارتباط نزدیک با ویژگیهای رشدی ریشه هستند را بهبود بخشند. از ویژگیهای رشدی ریشه می‌توان برای غلبه بر محدودیتهای محیطی، در راستای حفظ طول ریشه و در نتیجه حفظ جذب آب استفاده کرد (Wasson et al., 2012).
توسعه گیاهان زراعی دارای صفات مطلوب ریشه جهت دستیابی به عملکرد بالا در خاک های دارای محدودیت آبی، همواره مورد توجه بوده است (Rahnama et al., 2011). شناسایی تنوع ژنتیکی در ویژگیهای رشدی ریشه می تواند از طریق به‌نژادی گیاهی، به بهبود استقرار گیاهچه در خاک های خشک و شور و در نتیجه بهبود عملکرد گیاهان زراعی منتهی شود (Richards, 2008). با وجود این، اطلاعات محدودی در زمینهی تنوع ژنوتیپی از نظر ویژگیهای رشدی ریشه موجود است (Schweiger et al., 2009). مشخص شده است که گیاهان مقاوم و سازگار با محیط‌های خشک، از نظر توسعه سیستم ریشهای، دارای انعطاف پذیری زیادی هستند و این انعطاف پذیری ریشه به تنش خشکی، ممکن است اثرات نامطلوب خشکی بر عملکرد گیاهان زراعی را کاهش دهد (Ehdaie et al., 2012). وقتی ریشه گیاه در معرض کمبود آب خاک قرار میگیرد، میزان رشد و تمایز سلولهای ریشه تغییر میکند و معماری سیستم ریشه از نظر میزان انشعاب یا میزان طویل شدن انشعاب ریشه تغییر مییابد. به هر روی، برنامه‌های به‌نژادی در زمینه ویژگیهای رشدی ریشه، پیچیده‌تر از ویژگیهای رشدی اندام هوایی است (Wasson et al., 2012). از این رو، درک جامع از چگونگی توسعه سیستم ریشهای در شرایط تنش خشکی، امری ضروری است. در چنین شرایطی، با شناخت معماری سیستم ریشهای می‌توان فرصت مناسبی برای غلبه بر اثرات نامطلوب خشکی و افزایش عملکرد گیاهان زراعی فراهم آورد (Whitmore & Whalley, 2009). معماری سیستم ریشهای، در واقع ویژگیهای آرایش فضایی یک سیستم ریشهای را در محل رشد آن تعیین میکند و شامل ویژگیهای هندسی مانند زاویه رشد محور ریشه و ویژگیهای توپولوژیک آن است که بیانگر الگوی انشعاب زنی و رشد ریشه فرعی است (Manschadi et al., 2008). نتایج آزمایشگاهی و مزرعه‌ای نشان می‌دهد که این صفات می‌توانند اثرات تنش را با افزایش جذب آب، از طریق افزایش طول و تراکم ریشه و نیز استخراج بیشتر آب، از طریق افزایش نفوذ ریشه در عمق تعدیل کنند (Manschadi et al., 2008). گیاهان دارای ریشههای عمیقتر با قابلیت دسترسی به آب بیشتر، قادر به حفظ هدایت روزنهای بالا و در نتیجه فتوسنتز بالاتر هستند و تاج پوشش خنکتری نیز دارند (Lopes & Reynolds, 2010).
طول ریشه به‌عنوان شاخصی برای توانایی گیاهان جهت جذب آب از لایه های عمیقتر خاک و نفوذپذیری بهتر ریشه‌ها در خاک محسوب میشود. از این رو، آگاهی از وضعیت طول ریشه و توزیع آن در پروفیل خاک و همچنین آگاهی از اندازه و شکل سیستم ریشه، از اهمیت ویژهای برخوردار است (Wasson et al., 2012). پژوهش در زمینه صفات سیستم ریشهای، به دلیل روشهای پیچیده اندازهگیری، مستلزم صرف وقت زیادی است. همچنین استفاده از روشهای فنوتایپینگ برای مطالعات ریشهای در مزرعه با محدودیت همراه است و تفسیر صفات مورد نظر در شرایط آزمایشگاهی بر روی گیاهچه‌های جوان به صفات مورد نظر در سیستم ریشهای بالغ در مزرعه نیز مشکل است. از دیگر دلایل بی‌توجهی به ویژگیهای انطباقی ریشه به خشکی می‌توان به عمق ریشه‌دهی بیشتر و افزایش توزیع طول ریشه در عمق، مشکلات مربوط به عدم دسترسی به ریشه و ارزیابی سیستم ریشهای در خاک، شکل پذیری فنوتیپی وسیع صفات ریشه در پاسخ به شرایط مختلف خاک و عدم استفاده از روش غربالگری فنوتیپی سریع و مقرون به صرفه اشاره کرد (Manschadi et al., 2008). از این رو، توسعه سیستم‌های انتخابی برای ویژگیهای سیستم ریشهای بالغ، همواره با چالش رو به رو بوده است. با توجه به وجود موانع، انتخاب برای صفات متداول ریشهای، ویژگیهای معماری ریشه در مراحل اولیه نمو گیاه و رشد و کارکرد سیستم ریشه بالغ در پایان فصل ممکن است به عنوان شاخص مناسب انتخاب در برنامه های توسعه گیاه زراعی مورد توجه قرار گیرند. به توجه به اهمیت توسعه سیستم ریشهای در شرایط وجود تنشهای محیطی و با توجه به وجود ارتباط بین ویژگیهای معماری ریشه در مراحل اولیه رشد گیاه و مراحل بعدی رشد، این تحقیق با هدف بررسی اثر تنش خشکی بر ویژگیهای رشدی ریشه و تعیین تفاوت ژنوتیپی در صفات رشدی ریشه برخی ارقام حساس و متحمل به خشکی گندم مورد کشت در کشور در مرحله رشد رویشی انجام شد.
مواد و روش‌ها
این پژوهش در پاییز 1394 در گلخانه تحقیقاتی دانشکده کشاورزی دانشگاه شهید چمران اهواز، به صورت فاکتوریل و در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی با سه تکرار اجرا شد. در راستای اجرای این پژوهش، از لوله‌های پی‌وی‌سی با اندازه های یکسان، به قطر ۱۱ سانتی‌متر و طول ۵۰ سانتی متر استفاده شد و انتهای لولهها با دو لایه طلق ضخیم و شفاف پوشانده شد. برای خروج زه آب نیز تعدادی منفذ یکسان در انتهای لوله و بر روی طلق‌ها ایجاد شد. سپس درون هر لوله و به منظور سهولت خروج خاک و جلوگیری از آسیب به ریشه در زمان نمونه برداری، یک کیسه پلاستیکی هم اندازه با قطر دهانه و ارتفاع لولهها قرار داده شد (Fakhri, 2013). برای آماده سازی خاک مورد نیاز آزمایش، ابتدا از خاک چند مکان مختلف از مزرعه تحقیقاتی دانشکده کشاورزی نمونه برداری شد. پس از خشک شدن نمونه‌ها در هوای آزاد و عبور از الک دو میلی‌متری، میزان هدایت الکتریکی به روش وزنی یک به یک (خاک: آب v/w) با اضافه کردن آب دو بار تقطیر شده و عصاره‌گیری با کاغذ واتمن (41) پس از 24 ساعت، با استفاده از دستگاه هدایت سنج الکتریکی (Inolab Model) اندازهگیری شد. پس از خشک شدن نمونه خاک در مجاورت هوا، این نمونه‌ها از الک شش میلی‌متری عبور داده شدند. ماسه نیز پس از عبور از الک دو میلی‌متری با نسبت وزنی مشخص (40 درصد ماسه و 60 درصد خاک) به‌صورت جداگانه برای هر لوله با خاک ترکیب شد. برای هر لوله پی‌وی‌سی، پنج کیلوگرم خاک مخلوط شده در نظر گرفته شد (Fakhri, 2013). بر اساس نتایج آزمون خاک و حدود بحرانی عناصر، مقادیر محاسبه شده نیتروژن، فسفر و پتاس به خاک اضافه شد (جدول 1).
جدول 1- مشخصات فیزیکی و شیمیایی خاک مورد آزمایش
Table 1. Physiochemical properties of the soil
|
K2O (mg.kg-1) |
P2O5 (mg.kg-1) |
N (%) |
pH |
EC (dS.m-1) |
Soil texture |
|
200 |
10 |
0.46 |
7.5 |
1.8 |
Sandy loam |
درون هر لوله در هر مرحله از آزمایش، چهار بذر جوانه‌دار شده و هم اندازه در عمق دو سانتی‌متری خاک کشت شد و سپس با آب تصفیه شده با هدایت الکتریکی 3/0± 1 دسی زیمنس بر متر آبیاری شدند. لوله‌های پی‌وی‌سی در تمام مدت رشد، درون گلخانه‌ای با متوسط درجه حرارت 3 ±25 درجه سانتیگراد در روز و 3±15 درجه سانتیگراد در شب و نور طبیعی گلخانه نگهداری شدند. در مرحله رشد دو برگی، تعداد بوته‌ها با تنک کردن، کاهش یافت و دو بوته درون هر لوله پی‌وی‌سی نگهداری شد.
به منظور تعیین پتانسیل رطوبتی خاک در مکش‌های مورد نظر و به دنبال آن تعیین نیاز آبی گیاه در طی رشد و در نهایت اعمال تنش بر اساس تیمارهای آزمایش، منحنی رطوبتی خاک با استفاده از دستگاه صفحات فشاری
(Eijkelkamp Pressure Plate Extractor,)
در مکش‌های 3/0-، 3- ، 5- و 15- بار رسم شد (Klute & Dirksen., 1986).
اعمال تنش خشکی
ابتدا لوله‌های پی‌وی‌سی و کیسه پلاستیکی درون هر لوله به طور دقیق وزن شدند. برای هر لوله پی‌وی‌سی، پنج کیلوگرم از خاک تهیه شده در نظر گرفته شد. در هر آزمایش و برای هر واحد آزمایشی، یک لوله پی‌وی‌سی حاوی گیاه به عنوان شاهد، با هدف جلوگیری از آسیب رساندن دستگاه رطوبت سنج به ریشه گیاه اصلی در نظر گرفته شد. پس از کاشت گیاه و تا قبل از رسیدن به مرحله دو برگی، رطوبت همه لوله‌های حاوی گیاه در حد ظرفیت زراعی نگهداری شد. با توجه به تیمار مربوطه، درصد رطوبت حجمی خاک هر تیمار با استفاده از دستگاه رطوبت سنج (ProCheck, Decagon Devices, USA) اندازهگیری شد و سپس با استفاده از منحنی رطوبتی رسم شده، پتانسیل رطوبتی خاک تعیین شد. پس از تعیین پتانسیل آب خاک، در صورتی که میزان آن کمتر از میزان مورد نظر برای یک تیمار خاص بود (برای مثال، پتانسیل آب خاک برای تیمار شاهد از 3/0- بار به 2- بار رسیده بود)، ابتدا برای آگاهی از وضعیت درصد رطوبتی وزنی خاک، لوله‌های پی‌وی‌سی شاهد برای آن تیمار خاص، با استفاده از ترازو وزن شدند و از آن‌جا که وزن خاک خشک و لوله‌های پی‌وی‌سی و کیسه پلاستیکی قبل از کشت به‌طور دقیق اندازهگیری شده بود، درصد رطوبت وزنی و وزن آب خاک، با استفاده از رابطه 1 محاسبه شد. سپس با اختلاف این عدد با درصد رطوبت وزنی در نقطه پتانسیل مورد نظر، میزان آب آبیاری تعیین شد.
|
100× |
وزن خاک خشک - وزن اولیه خاک |
= درصد رطوبت وزنی |
|
وزن خاک خشک |
اندازه گیری محور اصلی و انشعابات ریشه
به‌منظور جداسازی ریشه‌ها از خاک، لوله‌های پی وی سی به مدت 30 دقیقه در ظروف حاوی آب قرار داده شدند تا خاک آنها اشباع شود. سپس کیسه پلاستیکی حاوی بستر کاشت و ریشه درون آن، به آهستگی از لولهها خارج شد. شستشوی ریشه‌ها با استفاده از فشار ملایم آب یک آبپاش، روی بستر کاشت و ریشه انجام شد و ریشه‌ها از خاک جدا شدند (Fakhri, 2013). طول ریشه اصلی با خط‌کش میلی‌متری اندازهگیری شد. طول ریشههای اصلی و فرعی نیز با استفاده از دستگاه اندازهگیری طول و سطح ریشه (DELTA-T SCAN, UK) انجام شد. طول ریشههای فرعی، از تفریق مجموع طول ریشههای اصلی و فرعی از طول ریشه اصلی به‌دست آمد (Rahnama et al., 2011).
آزمایش اول
با هدف تعیین سطوح مورد نظر پتانسیل آب خاک در ایجاد تفاوتهای رشدی ریشه، آزمایشی به صورت طرح فاکتوریل و در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی با سه تکرار انجام شد.
در این آزمایش، دو رقم گندم شامل: رقم روشن به عنوان رقم متحمل به خشکی و رقم قدس به عنوان رقم حساس به خشکی، به عنوان فاکتور اول (et al., 2015 Mortazavian) و سطوح مختلف خشکی شامل: پتانسیل آب خاک در مکش‌های 3/0- بار (شاهد)، 2- تا 3- بار، 5- تا 6-، 7- تا 8- و 10- تا 11- بار به عنوان فاکتور دوم در نظر گرفته شدند.
برای هر تیمار در هر تکرار، دو لوله پی‌وی‌سی در هر واحد آزمایشی در نظر گرفته شد و آزمایش در مجموع شامل 60 لوله پی‌وی‌سی بود. لولهها در شرایط گلخانه با نور طبیعی و میانگین دمای 3±24 درجه سانتی گراد (روز) و3±14 درجه سانتی گراد (شب) نگهداری شدند. سپس گیاهچهها با رسیدن به آغاز مرحله دو برگی (نه روز پس از کاشت)، به مدت 14 روز در معرض تنش خشکی قرار گرفتند. پتانسیل آب خاک برای سطوح خشکی، در طول مدت آزمایش ثابت نگه داشته شد. سپس گیاهان به منظور اندازهگیری محور ریشه برداشت شدند.
آزمایش دوم
به‌منظور بررسی وجود تفاوت بین ارقام گندم از نظر رشد ریشه در پاسخ به خشکی، هشت رقم گندم در دو سطح تنش خشکی (با توجه به نتایج آزمایش قبلی)، به صورت فاکتوریل و در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی مورد بررسی قرار گرفتند. ارقام گندم شامل روشن، بم، طبسی و ماهوتی به عنوان ارقام متحمل به خشکی) و ارقام شیراز، فلات، قدس و اترک به عنوان ارقام حساس به خشکی (Maghsoudi & Maghsoudi Moud, 2007; Karami & Rokhzadi, 2012; Mortazavian et al., 2015) انتخاب شدند. سطوح خشکی شامل پتانسیل آب خاک 3/0- بار (شاهد) و 7- تا 8- بار در نظر گرفته شدند. در این آزمایش، دو لوله پی‌وی‌سی در هر واحد آزمایشی با سه تکرار، در شرایط گلخانه با نور طبیعی و میانگین دمای 3±26 درجه سانتیگراد (روز) و3±15 درجه سانتیگراد (شب) نگهداری شدند. آزمایش در مجموع شامل 96 لوله بود. گیاهچه ها با رسیدن به آغاز مرحله دو برگی، به مدت 14 روز در معرض تنش قرار گرفتند و همانند آزمایش اول، برای اندازهگیری طول ریشه برداشت شدند.
آزمایش سوم
با توجه به نتایج حاصل از آزمایش قبلی و به‌منظور مطالعه دقیقتر ویژگیهای رشدی ریشه و بررسی وضعیت انشعاب‌زنی ریشه در واکنش به تنش خشکی، دو رقم بم و روشن به عنوان ارقام متحمل به خشکی و ارقام قدس و اترک به عنوان ارقام حساس به خشکی، در دو سطح خشکی شامل پتانسل آب خاک 3/0- بار (شاهد) و 7- تا 8- بار، به صورت فاکتوریل و در قالب طرح پایه کاملاً تصادفی مورد مطالعه قرار گرفتند. دو لوله پی‌وی‌سی در هر واحد آزمایشی با سه تکرار، در شرایط گلخانه‌ای با نور طبیعی و میانگین دمای 3±26 درجه سانتیگراد (روز) و3±15 درجه سانتیگراد (شب) نگهداری شدند. آزمایش در مجموع شامل 48 لوله بود. گیاهچهها با رسیدن به آغاز مرحله دو برگی، به مدت 21 روز در معرض تنش قرار گرفتند و برای اندازهگیری طول ریشههای اصلی و فرعی برداشت شدند.
داده‌های به دست آمده با استفاده از نرم افزارآماری SAS تجزیه و تحلیل)تجزیه واریانس و همبستگی صفات( شدند و مقایسه میانگینها با استفاده از نرم افزارMSTATC انجام شد. برای رسم نمودارها از نرم افزار Excel استفاده شد.
نتایج و بحث
آزمایش اول: بهترین سطح خشکی در ایجاد تفاوتهای رشدی ریشه
نتایج تجزیه واریانس نشان داد که بین سطوح مختلف خشکی، از نظر ویژگیهای رشدی سیستم ریشه شامل طول ریشه و وزن خشک ریشه در سطح احتمال یک درصد و برای تعداد ریشه اصلی در سطح احتمال پنج درصد تفاوت معنیداری وجود داشت. بین ارقام نیز از نظر طول ریشه و وزن خشک ریشه در سطح یک درصد تفاوت معنیداری مشاهده شد اما این تفاوت از نظر تعداد ریشه اصلی معنیدار نبود. بر همکنش بین سطوح مختلف خشکی و ارقام برای صفات مورد مطالعه، تفاوت معنیداری نشان نداد (جدول 2).
جدول 2- تجزیه واریانس پارامترهای رشدی ریشه ارقام گندم نان، دو هفته پس از مواجهه با سطوح تنش خشکی
Table 2. Variance analysis of root growth parameters of bread wheat cultivars two weeks after exposure to drought stress levels
|
Means of squares |
||||
|
Root dry weight |
Root number |
Seminal root length |
df |
Source of variance |
|
**0.0015 |
ns0.03 |
**2198 |
1 |
Cultivar |
|
**0.0005 |
*4.21 |
**2151 |
4 |
Drought |
|
0.00002ns |
0.28ns |
111 ns |
4 |
Cultivar ×Drought |
|
0.00005 |
1.46 |
112 |
20 |
Error |
|
13.14 |
18.82 |
9.24 |
- |
CV (%) |
:ns غیر معنیدار، * و ** به ترتیب معنیدار در سطح احتمال پنج و یک درصد.
ns: Non-significant, ** and *: significant at 1% and 5% of probability levels respectively.
نتایج مقایسه میانگین نشان داد که طول ریشههای اصلی در شرایط تنش خشکی کاهش یافت. این کاهش در سطوح اولیه تنش، تفاوت معنیداری را نسبت به شاهد نشان نداد اما با کاهش پتانسیل آب خاک به 5- بار، طول ریشه اصلی به‌طور معنیداری کاهش یافت. همچنین بین ارقام از نظر طول ریشههای اصلی، تفاوت معنی داری وجود داشت و مقادیر آن در رقم روشن، بیشتر از رقم قدس بود (جدول 3). تعداد ریشههای اصلی نیز در شرایط تنش خشکی کاهش یافت و میزان این کاهش در پتانسیل 7- و 10- بار نسبت به شاهد، تفاوت معنیداری را نشان داد اما این تفاوت بین ارقام معنیدار نبود. وزن خشک ریشه نیز در شرایط تنش خشکی کاهش یافت. با افزایش روند خشکی از پتانسیل 5- بار، تفاوت محسوسی مشاهده شد و این تفاوت در پتانسیل 7- بار نسبت به شاهد معنیدار بود. همچنین وزن خشک ریشه در رقم حساس به خشکی قدس، کاهش بیشتری را نسبت به رقم متحمل به خشکی روشن نشان داد (جدول 3).
جدول 3- مقایسه میانگین پارامترهای رشدی ریشه ارقام گندم نان دو هفته پس از مواجهه با سطوح تنش خشکی
Table 3- Mean comparison of root growth parameters of bread wheat cultivars two weeks after exposure to drought stress levels
|
Means |
|||
|
Root dry weight |
Root number |
Seminal root length |
|
|
(gr) |
(cm) |
(cm) |
|
|
|
|
|
Cultivars |
|
0.058 a |
6.46a |
†123 a |
Roshan |
|
0.044 b |
6.40a |
106 b |
Qods |
|
|
|
|
Drought stress |
|
0.058a |
7.1 a |
135 a |
Control |
|
0.060 a |
7.3 a |
132 a |
2 bar - ~ |
|
0.055 a |
6.5 a |
113 b |
5 bar - ~ |
|
0.040 b |
5.6 b |
97 bc |
7 bar - ~ |
|
0.041 b |
5.5 b |
94 c |
10 bar - ~ |
†میانگین های دارای حرف مشترک برای هر صفت با استفاده از آزمون چند دامنهای دانکن، اختلاف معنیداری در سطح احتمال پنج درصد نداشتند.
Means followed by the same letter for each trait are not significantly different (P = 0.05), according to Duncan’s Multiple Range Test.
آزمایش دوم: تفاوت ژنوتیپی در ویژگیهای رشدی ریشه
نتایج تجزیه واریانس ویژگیهای رشدی سیستم ریشه هشت رقم گندم و تیمار خشکی نشان داد که بین دو سطح خشکی و بین ارقام گندم از نظر طول، تعداد و وزن خشک ریشه و طول دو ریشه بلندتر تفاوت بسیار معنیداری وجود داشت. برهمکنش بین سطوح خشکی و ارقام نیز تفاوت معنیداری را برای صفات طول ریشه و ماده خشک ریشه نشان داد (جدول 4).
جدول 4- تجزیه واریانس پارامترهای رشدی ریشه هشت رقم گندم نان، دو هفته پس از مواجهه با تنش خشکی
Table 4. Variance analysis of root growth parameters of eight bread wheat cultivars two weeks after exposure to drought stress
|
Means of squares |
|||||
|
Two longest seminal axile roots |
Root number |
Seminal root length |
Root dry weight |
df |
Source of variance |
|
** 204 |
*1.22 |
**992 |
**0.00057 |
7 |
Cultivar |
|
** 271 |
** 70.1 |
**28846. |
**0.0066 |
1 |
Drought |
|
ns 81 |
ns 0.369 |
**471 |
**0.000223 |
7 |
Cultivar×Drought |
|
42.61 |
0.379 |
45.9 |
0.000028 |
32 |
Error |
|
12.83 |
10.11 |
6/16 |
8/8 |
- |
CV (%) |
|
: n.s غیر معنیدار، * و ** به ترتیب معنیدار در سطح احتمال پنج و یک درصد ns: Non-significant, ** and *: significant at 1% and 5% of probability levels, respectively. |
|||||
نتایج مقایسه میانگین ارقام نشان داد که پتانسیل 7- بار، سبب کاهش طول ریشه در همه ارقام شد. بین ارقام از نظر میزان رشد ریشه اختلاف معنیداری وجود داشت و ارقام بم و فلات، به ترتیب کمترین و بیشترین میزان کاهش طول ریشه را در بین ارقام دارا بودند. همچنین در مقایسه با شاهد ارقام متحمل به خشکی، دارای میانگین طول ریشه بیشتری نسبت به ارقام حساس بودند (شکل 1 الف). ارتباطی بین رشد ریشه در شرایط شاهد و تنش خشکی مشاهده نشد؛ به عبارتی ارقامی که در شرایط شاهد دارای رشد ریشه بالایی بودند، لزوماً در شرایط تنش قادر به حفظ مقادیر بالای رشد ریشه خود نبودند. برای مثال، ارقام فلات و شیراز در طی مرحله رشد رویشی و در شرایط شاهد، دارای رشد ریشه بالایی بودند ولی در شرایط تنش، دارای بالاترین میزان کاهش رشد ریشه در مقایسه با شاهد بودند (شکل 1 الف).به هر روی، تفاوت بین ارقام از نظر طول دوره رشدی و تأثیر آن بر وضعیت رشد ریشه نیز بایستی در نظر گرفته شود. تفاوت ژنتیکی در رشد ریشه گندم نان (Manschadi et al., 2008)، گندم دوروم (Rahnama et al., 2011)، جو (Shelden et al., 2013)، سورگوم و ذرت (Singh et al., 2010) در واکنش به تنشهای خشکی و شوری قبلاً نیز گزارش شده است. با توجه به واکنش رشدی متفاوت ریشه گیاه، به‌نظر می‌رسد که تفاوت در طول ریشه در شرایط شاهد و تنش، ناشی از تنوع ژنتیکی در پاسخ رشدی ارقام باشد. بنابراین، وجود تنوع ژنتیکی بالا در ویژگیهای رشدی ریشه و گزینش ژنتیکی به منظور غلبه بر محدودیتهای خاک، این امکان را فراهم میآورد تا در برنامه‌های به نژادی، از صفات مورفولوژیکی ریشه به‌منظور بهبود جذب آب عمقی خاک استفاده شود (Wasson et al., 2012). به همین علت، استفاده از ویژگیهای رشدی ریشه در راستای حفظ طول ریشه و در نتیجه حفظ جذب آب میتواند به عنوان اولین هدف برنامه‌های به‌نژادی در شرایط تنشهای خشکی و شوری در نظر گرفته شود.
وزن خشک ریشه نیز در شرایط تنش در همه ارقام به‌طور معنیداری کاهش یافت. کمترین میزان کاهش وزن خشک ریشه نسبت به شاهد در رقم متحمل طبسی و بیشترین میزان کاهش، در رقم حساس فلات مشاهده شد (شکل 1 ب). با توجه به این نتایج مشخص میشود که میزان کاهش ماده خشک ریشه در شرایط تنش در ارقام مختلف متفاوت است و این کاهش در ارقام حساس، به‌مراتب بیشتر از ارقام متحمل به خشکی بود.
بین ارقام نیز از نظر تعداد ریشه اصلی، تفاوت قابل توجهی مشاهده شد و ارقام متحمل به خشکی، دارای تعداد ریشه اصلی بیشتری بودند. تنش خشکی، سبب کاهش تعداد ریشه اصلی شد، به‌گونهای که تنش، سبب کاهش 34 درصدی تعداد ریشه اصلی همه ارقام در مقایسه با شاهد شد؛ اگرچه میزان کاهش آن در ارقام متحمل به خشکی نسبت به ارقام حساس کمتر بود (جدول 5).
به نظر می‌رسد که ارقام متحمل، با تعداد ریشه اصلی بیشتر، قادرند در شرایط پتانسیل پائین آب خاک، جذب بیشتر آب از خاک را به خوبی حفظ نمایند. در نتیجه، ارقام متحمل به خشکی با حفظ و تولید تعداد ریشه بیشتر، میزان جذب آب را در شرایط تنش، بالا نگه می‌دارند و از این طریق، قادر به تحمل تنش خواهند بود. تعداد ریشه، یک ویژگی ژنتیکی است که تحت تأثیر شرایط محیطی نیز قرار میگیرد (Manschadi et al., 2006). در ارقام گندم، از نظر تعداد ریشه اصلی، تنوع ژنتیکی وجود دارد و ارقام گندم در شرایط معمول، بین پنج تا هشت ریشه اصلی دارند (Richards, 2008). در پژوهش حاضر و بر مبنای وجود همبستگی مثبت و معنیدار بین تعداد ریشه اصلی با طول ریشه اصلی (**69/0=r) (جدول 6) پیشنهاد میشود که انتخاب ویژگیهای ریشه از جمله تعداد ریشههای اصلی ممکن است به شناسایی ژنوتیپ‌هایی با معماری سیستم ریشه سازگار با تحمل خشکی کمک کند (Manschadi et al., 2006).
جدول 5- مقایسه میانگین پارامترهای رشدی ریشه هشت رقم گندم نان دو هفته پس از مواجهه با تنش خشکی
Table 5. Mean comparison of root growth parameters of eight bread wheat cultivars two weeks after exposure to drought stress
|
Means |
||
|
Two longest seminal axile roots (cm) |
Root number |
|
|
|
|
Drought stress |
|
58.38 a† |
7.2 a |
Control |
|
43.33 b |
4.8 b |
7 bar - ~ |
|
|
|
Cultivars |
|
57.41 a |
5.33 b |
Roshan |
|
56.31 a |
6.16 ab |
Bam |
|
51.31 ab |
6.16 ab |
Tabasi |
|
53.71 ab |
6.20 ab |
Mahoti |
|
46.08 bc |
5.5 ab |
Shiraz |
|
40.37 c |
6.5 b |
Falat |
|
52.72 a |
5.6 ab |
Qods |
|
48.13 ab |
6.6 a |
Atrak |
† میانگین های دارای حرف مشترک برای هر صفت، با استفاده از آزمون چند دامنهای دانکن و در سطح احتمال پنج درصد، دارای اختلاف معنی دار نیستند.
Means followed by the same letter for each trait are not significantly different (P = 0.05), according to Duncan’s Multiple Range Test.
جدول6- ضرایب همبستگی پارامترهای رشدی ریشه هشت رقم گندم دو هفته پس از مواجهه با خشکی
Table 6. Correlation parameters of root growth characteristic of eight bread wheat cultivars two weeks after drought stress
|
4 |
3 |
2 |
1 |
Characteristic |
|
|
|
|
|
1 |
Seminal root length |
1 |
|
|
|
1 |
0.73 ** |
Two longest seminal axile roots |
2 |
|
|
1 |
0.21ns |
0.69 ** |
Root number |
3 |
|
1 |
0.44** |
0.39* |
0.49 ** |
Root dry weight |
4 |
:ns غیر معنیدار، * و ** به ترتیب معنیدار در سطح احتمال 5 و 1 درصد
ns: Non-significant, ** and *: significant at 0.01 and 0.05 probability levels
آزمایش سوم: انشعابزنیریشهدرپاسخبهتنش خشکی
نتایج حاصل از تجزیه واریانس ویژگیهای رشدی سیستم ریشه شامل طول دو ریشه بلندتر، طول ریشه اصلی و انشعابات، تعداد ریشه اصلی، سطح ریشه، فاصله اولین انشعاب تا نوک ریشه و وزن خشک ریشه، تفاوت معنیداری را بین دو سطح خشکی در سطح احتمال یک درصد نشان داد. همچنین تفاوت معنیداری در تمامی پارامترهای ذکر شده، به‌جز برای فاصله اولین انشعاب تا نوک ریشه، طول دو ریشه بلندتر و تعداد ریشه اصلی بین ارقام مشاهده شد. اثر برهمکنش بین رقم و سطوح خشکی بر وزن خشک ریشه، طول انشعابات ریشه و سطح ریشه نیز در سطح احتمال یک درصد معنیدار بود (جدول 7).
جدول 7- تجزیه واریانس پارامترهای رشدی ریشه چهار رقم گندم نان، سه هفته پس از مواجهه با تنش خشکی
Table 7- Variance analysis of root growth parameters of four wheat cultivars three weeks after exposure to drought stress
|
Means of squares |
||||||||
|
Seminal root length |
Two longest seminal axile roots |
Root number |
Distance between root tip and the first root branch |
Branch root length |
Root area |
Root dry weight |
df |
Source of variance |
|
*865 |
136 ns |
1.152 ns |
0.67ns |
**40665 |
**588361 |
**0.0023 |
3 |
Cultivar |
|
**10024 |
**1713 |
**51.04 |
**10.93 |
**262069 |
**8119252 |
**0.0053 |
1 |
Drought |
|
287 ns |
150ns |
0.152 ns |
0.40 ns |
**13086 |
**625758 |
*0.0002 |
3 |
Cultivar ×Drought |
|
227 |
53 |
0.40 |
0.39 |
761.005 |
896.9 |
0.000056 |
16 |
Error |
|
10.8 |
9.6 |
9.6 |
16.1 |
6.3 |
1.7 |
10.37 |
|
CV (%) |
ns، غیر معنیدار، * و ** به ترتیب معنیدار در سطح احتمال پنج و یک درصد.
ns: Non-significant, ** and *: significant at 1% and 5% of probability levels, respectively.
نتایج مقایسه میانگین ها نشان داد که طول ریشه اصلی و طول دو ریشه بلندتر در شرایط تنش نسبت به شاهد، به‌طور معنیداری کاهش یافت. همچنین در مجموع طول ریشه اصلی، تفاوت معنیداری بین ارقام مشاهده شد و ارقام متحمل، دارای میانگین طول ریشه بیشتری نسبت به ارقام حساس بودند. در بین ارقام متحمل، رقم بم بیشترین و رقم اترک کمترین میزان طول ریشه اصلی را به خود اختصاص دادند، اما برای طول دو ریشه بلندتر، تفاوت معنیداری بین ارقام مشاهده نشد (جدول 8). این نتیجه بیانگر آن است که با ادامه روند کاهش پتانسیل آب خاک در طی مدت زمان طولانی‌تر، تنش خشکی میتواند تاثیرات معنیداری بر کاهش طول ریشه یا عمق ریشه دهی داشته باشد (Wang et al., 2009).
تنش خشکی در پتانسیل 7- بار، باعث کاهش معنیدار تعداد ریشه نسبت به شاهد شد؛ اگرچه مقایسه میانگین چهار رقم، نشان‌دهنده عدم وجود تفاوت معنیدار بین ارقام حساس و متحمل بود (جدول 8). نتایج سایر تحقیقات، بیانگرکاهش تعداد ریشه اصلی گندم در شرایط تنش شوری (Shelden et al., 2013; Fakhri, 2013) و خشکی (Manschadi et al., 2006) بود. تنش خشکی سبب کاهش قدرت انشعاب‌زنی ریشه در همه ارقام شد. همچنین بین ارقام از نظر طول انشعابات، تفاوت ژنتیکی مشاهده شد و مقایسه میانگین ارقام نشان داد که کاهش طول انشعابات در ارقام متحمل بم و روشن در مقایسه با ارقام حساس اترک و قدس، کمتر بود (شکل 2).
جدول 8- مقایسه میانگین پارامترهای رشدی ریشه چهار رقم گندم، نان سه هفته پس از مواجهه با تنش خشکی
Table 8. Mean comparison of root growth parameters of four wheat cultivars three weeks after exposure to drought stress
|
|
Distance between root tip and the first root branch (cm) |
Root number |
Two longest seminal axile roots (cm) |
Seminal root length (cm) |
|
Cultivars |
|
|
|
|
|
Roshan |
a 2.88 |
a 7 |
a 82.65 |
†156 b |
|
Bam |
a 2.43 |
a 7 |
74.55 b |
173 a |
|
Qods |
a 1.93 |
a 6.3 |
70.90 b |
c 147 |
|
Atrak |
a 1 |
a 6.16 |
70.40 b |
cd 140 |
|
Drought stress |
|
|
|
|
|
Control |
a 3.09 |
8.08 a |
84.83 a |
a 156.33 |
|
7 bar - ~ |
b 1.74 |
b 5.16 |
b 67.50 |
127.99 b |
† میانگین های دارای حرف مشترک برای هر صفت، با استفاده از آزمون چند دامنهای دانکن و در سطح احتمال پنج درصد، دارای اختلاف معنی دار نیستند.
Means followed by the same letter for each trait are not significantly different (P = 0.05), according to Duncan’s Multiple Range Test.
جلوگیری از رشد ریشههای جانبی در اثر شرایط تنش خشکی (Sánchez-Calderón et al., 2013) و تحریک انشعاب‌زنی ریشه در شرایط تنش شوری (Rahnama et al., 2011)، به عنوان یک واکنش انطباقی برای تضمین بقای گیاه در شرایط نامناسب رشد پذیرفته شده است (Sánchez-Calderón et al., 2013). تنش اسمزی سبب کاهش طول ریشه و آغازش ریشه جانبی میشود و مشخص شده است که پیام‌های هورمونی، این کنترل را بر عهده دارند (Rahnama et al., 2011). پتانسیل اسمزی پایین خاک، سبب تغییر حجم و عمق توسعه سیستم ریشه، میزان طویل شدن ریشه و تعداد ریشههای جانبی در تعداد زیادی از گونه‌های گیاهی از جمله آرابیدوپسیس میشود (Deak & Malamy, 2005) و گیاهان دارای ریشه اصلی طویلتر و تعداد ریشههای جانبی بیشتر، تحمل بالاتری به شرایط تنش دارند.
بر اساس نتایج به دست آمده، بین ارقام مورد بررسی و تیمار خشکی، اختلاف معنیداری از لحاظ سطح ریشه وجود داشت. میانگین سطح ریشه در ارقام متحمل به خشکی، به مراتب بیشتر از ارقام حساس بود. هم چنین با کاهش پتانسیل آب خاک، میانگین سطح ریشه در همه ارقام، به‌طور معنیداری کاهش یافت و میزان کاهش در ارقام متحمل، به مراتب بیشتر از ارقام حساس به خشکی بود (شکل 3). کاهش سطح ریشه در شرایط تنش و برتری ارقام متحمل نسبت به ارقام حساس، در سایر مطالعات نیز گزارش شده است (Dargahi et al., 2012). اگرچه در بررسی تأثیر تنش آبی بر توزیع و پراکندگی ریشه سویا بین شرایط آبیاری و تنش خشکی، اختلاف معنیداری برای سطح ریشه مشاهده نشد (Benjamin & Nielsen, 2006). بیشترین میزان کاهش سطح ریشه در شرایط تنش، در رقم حساس اترک و کمترین میزان کاهش در رقم متحمل روشن مشاهده شد.
نتایج مقایسه میانگین نیز نشان داد که در تیمارهای مورد بررسی، وزن خشک ریشه در تمام ارقام در شرایط تنش خشکی نسبت به شاهد کاهش یافت (شکل 4)؛ اگرچه در شرایط عدم تنش نیز تفاوت معنیداری از نظر وزن خشک ریشه بین ارقام مشاهده شد. بیشترین و کمترین میزان کاهش وزن خشک ریشه در شرایط تنش خشکی، به‌ترتیب در رقم حساس قدس و رقم متحمل روشن مشاهده شد (شکل 4). به‌نظر می‌رسد که کاهش ماده خشک ریشه میتواند به دنبال کاهش میزان رشد ریشه یا کاهش فتوسنتز در گیاه رخ دهد (Fakhri, 2013). کاهش وزن خشک ریشه گندم به دلیل کاهش طول ریشه در شرایط شوری نیز قبلاً مشخص شده اشت (Grewal, 2010).
تنش خشکی، سبب کاهش فاصله اولین انشعاب تا نوک ریشه شد و میزان کاهش برای همه ارقام در حدود 44 درصد بود؛ اگرچه بین ارقام نیز از نظر فاصله اولین انشعاب تا نوک ریشه، تفاوت قابل ملاحظه‌ای مشاهده نشد (جدول 8). در شرایط شوری نیز فاصله بین نوک ریشه و موقعیت ناحیه تمایز بافت، تغییر میکند (Rahnama et al., 2011)؛ اگرچه کوتاه‌تر شدن فاصله بین نوک و سلولهای ناحیه توسعه و تمایز در سایر تنشها نیز مشاهده شده است. برای مثال، دمای پایین خاک، میزان رشد طولی ریشه و میزان تمایز ریشههای مویین و انشعابات ریشهای نزدیک به نوک ریشه را در گندم و ذرت تحت تأثیر قرار داد (Watt et al., 2006).
نتیجه‌گیری کلی
نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که تنش خشکی در پتانسیل آب خاک پایین تر از 5- بار، سبب کاهش معنی دار پارامترهای رشدی ریشه شد. همچنین بین ارقام از نظر رشد ریشه و واکنش به تنش خشکی، تفاوت ژنتیکی وجود داشت، به‌گونهای که ارقام متحمل و حساس به خشکی، واکنش متفاوتی به تنش خشکی نشان دادند. بنابراین، یک عامل مهم در میزان تحمل به خشکی گیاه گندم، چگونگی واکنش و توسعه سیستم ریشهای آن است که میتواند تحت تأثیر تنش خشکی قرار گیرد و تفاوت موجود در بین ارقام، به لحاظ صفات رشدی ریشه ممکن است تفاوت آنها را در مقاومت به تنش خشکی آشکار سازد. با توجه به این که ارقام گندم و جو دارای ریشه اصلی طویلتر و انشعابات ریشه ای بیشتر، تحمل بالاتری به تنشهای محیطی (Shelden et al., 2013; Rahnama et al., 2011) دارند، از این تفاوت بین ژنوتیپها می‌توان جهت گزینش ارقام و ژنوتیپ‌های کارآمد در جذب آب و مواد غذایی از خاک و نیز ارقام متحمل به تنشهای محیطی از جمله خشکی استفاده کرد.
به هر روی، به‌نظر می رسد که توسعه گیاهان زراعی با صفات مطلوب ریشه در مناطق خشک و دارای محدودیت آبی، یکی از راه های غلبه بر محدودیتهای محیطی و دستیابی به عملکرد مطلوب محصولات کشاوری باشد. همچنین پیشنهاد میشود که جهت اطمینان از نتایج این پژوهش، ارزیابی واکنش رشدی ریشه ارقام گندم در سایر مراحل رشدی گیاه نیز انجام شود.
REFERENCES
REFERENCES
)
