مؤسسه انتشارات دانشگاه تهران علوم گیاهان زراعی ایران 2008-4811 44 4 2013 12 22 Cloning of WDREB2 Transcription Factor in pBI121 Expression Vector and Transfer to Tomato In Order To Improve Cold Stress Resistance همسانه‌سازی عامل رونویسی WDREB2گندم در ناقل بیان pBI121 و انتقال به گوجه‌فرنگی به‌منظور ایجاد تحمل به تنش سرما 635 644 50333 10.22059/ijfcs.2013.50333 FA سیما سازگاری دانشجوی کارشناسی ارشد، دانشکدۀ کشاورزی، دانشگاه شیراز علی نیازی دانشیار، دانشکدۀ کشاورزی، دانشگاه شیراز Journal Article 2012 06 20 Abiotic stress such as cold and drought has adverse effects on plants growth and development. Abiotic stress resistance is one of the most important goals in plant breeding. This goal can be achieved through transcription factor gene transfer to plants. Recent studies show many successes in improving abiotic stress resistance by use of transcription factor gene transfer. The objective of the research was to clone wheat alpha isoform of <em>WDREB2</em>, effective abiotic stress responsive element, in suitable expression vector, and its transfer to tomato in order to improve cold stress resistance. The gene was cloned in expression vector pBI121, and transferred to tomato through <em>Agrobacterium tumefaciens </em>C58 strain. In order to admit transformation, DNA extraction and PCR with specific primer was done on transgenic and nontransgenic tomato plants. Verification of <em>WDREB2</em> expression was done by RT- PCR after RNA extraction and cDNA synthesis. Bioassay test of transgenic plants under cold stress treatment was performed. Phonotypical comparison between transgenic and normal plants under cold stress confirmed cold stress resistance of transgenic lines. تنش‌های غیرزیستی از قبیل خشکی و سرما، تأثیرات مضری بر رشد و عملکرد گیاهان دارند و تحمل به آنها از جمله اهداف اصلی اصلاح گیاهان بوده است. افزایش تحمل به چند تنش با استفاده از انتقال یک ژن تنظیمی مانند عوامل رونویسی که در مسیر‌های تنظیمی متعددی دخالت دارند، ممکن است. تحقیقات انجام‌گرفته تاکنون حاکی از موفقیت در افزایش تحمل به تنش‌های غیرزنده با استفاده از عوامل تنظیمی بوده است. این پژوهش با هدف همسانه‌سازی ایزوفرم آلفا ژن <em>WDREB2</em> در ناقل بیان مناسب گیاهی و انتقال این ژن به گیاه گوجه‌فرنگی به‌منظور بهبود تحمل به تنش سرما انجام گرفت. عامل رونویسی <em>WDREB2</em> یکی از عوامل رونویسی مهم در گندم بوده و در تحمل به تنش‌های غیرزیستی مؤثر است. همسانه‌سازی ژن <em>WDREB2</em> در ناقل بیانpBI121  و انتقال این ژن به گیاه گوجه‌فرنگی توسط <em> </em><em>tumefaciens</em> <em>Agrobacterium</em>سویۀ C58 انجام گرفت. به‌منظور تأیید تراریختی گیاهان گوجه‌فرنگی استخراج DNA و واکنش PCR با آغازگرهای اختصاصی انجام گرفت. وجود قطعۀ مربوط به ژن <em>WDREB2</em>، تراریختی گیاهان گوجه‌فرنگی را تأیید می‌کند. تأیید بیان ژن <em>WDREB2</em> با استفاده از تکنیک RT PCR پس از استخراج RNA و سنتز cDNA صورت گرفت. زیست‌سنجی گیاهان تراریخت و شاهد با تیمار گیاهان در دمای4 درجۀ سانتی‌گراد به‌منظور اعمال تنش سرما انجام گرفت. مقایسۀ علائم فنوتیپی تنش سرما بین گیاهان شاهد و تراریخت، نقش این ژن را در القای تحمل تأیید می‌کند. https://ijfcs.ut.ac.ir/article_50333_9ad4c3c1063d3ba8ab89262e12312cd4.pdf